Leucograma
O leucograma representa a parte do hemograma que estuda as alterações quantitativas e qualitativas das células de defesas do sangue, os leucócitos. A utilização desse exames na maioria dos casos não possibilitará o diagnóstico específico das enfermidades, já que muitas destas podem gerar respostas leucocitárias semelhantes, em contrapartida o conhecimento das alterações quantitativas e morfológicas das células de defesa auxilia ao clínico na busca do diagnóstico das doenças que acometem os animais.O leucograma é dividido em três partes:
* Contagem de leucócitos totais;
* Contagem diferencial de leucócitos;
* Observação de alterações morfológicas.
Protocolos:
Contagem de Leucócitos totais
Materiais:Tubo de vidro de 4 ml
Reagente de Turk ( Solução de ácido acético e violeta genciana)
Câmara de Newbauer
Lamínula 24x24
Pipeta de 1 ml
Pipeta de 20 uL
Contador de células
Sangue do paciente coletado com anticoagulante ( EDTA) devidamente acondicionado e identificado com nome do paciente, nome do proprietário e data da coleta.
Método:
Pipetar no tubo 0,4 ml de reagente de Turk, pipetar 20 uL de sangue e homogenizar. Preencher a câmara de Neubauer com algumas gotas da solução. Contar os leucócitos nos quatro quadrados maiores e multiplicar por 50.
Cálculo do fator:
Volume dos quadrados: 1/10 mm3 ( multiplicar por 4 quadrados que serão contados) = 4/10
Diluição da amostra: 1/20
Leucócitos totais: 4/10 x 1/20 = 1/50 ( significa que os leucócitos contados representam 50 vezes menos que o valor real.)
Ou seja multiplicando o valor por 50 ( fator ) calcúla-se o valor real.
Pode ser expresso em mm3 ou uL pois são correspondentes.
Exemplo: Quadrado 1 = 33
Quadrado 2 = 34
Quadrado 3 = 28
Quadrado 4 = 31
Total da contagem = 126
Leucócitos totais = 126 x50 = 6300 mm3 ou uL
Cálculo de células nucleadas corrigidas
Descontar a presença de eritrócitos jovens ( metarrubrícitos) que por ventura sejam contados durante a contagem total de leucócitos na câmara de Neubauer ou pelos contadores automáticos de células.
Ex: Durante a visualização da lâmina corada foram verificados 70 e neutrófilos e 30 e linfócitos ( representando 100%) e além disso foram contados 30 metarrubrícitos ( 30 % de células a mais contadas) . A contagem de leucócitos foi de 6300 células nucleadas ( leucócitos e metarrubricitos que foram contados juntos). Para saber a quantidade de leucócitos efetiva é só fazer a seguinte regra de três:
6.300 (Leucócitos +Metarrubricitos) equivale a 130 %
x (Leucócitos) equivale a 100%
x= 6300 x 100
130
x= 4.846 Leucócitos /uL
Contagem diferencial de Leucócitos
MaterialLâmina confeccionada da mesma amostra que esta sendo utilizada coradas com métodos de Giemsa ou Panótico
Microscópio óptico
Óleo de imersão
Contador diferencial de leucócitos
Conta-se 100 leucócitos, portanto ao contagem final o valor obtido será em percentual ou valor relativo diferenciando-os em:
Valor Relativo
Neutrófilos Mielócitos 0 %
Neutrófilos Metamielócitos 0%
Neutrófilos Bastonetes 0%
Neutrófilos Segmentados 60%
Linfócitos 30%
Monócitos 4%
Eosinófilos 3%
Basófilos 3%
Para o cálculo do valor absoluto utiliza-se o valor relativo de cada célula e a contagem dos leucócitos totais. O valor relativo é o percentual que cada célula representa do valor de leucócitos totais.
Ex: Leucócitos Totais 6.300 uL
Valor Relativo Valor absoluto
Neutrófilos Segmentados 60% 3.780 uL
Linfócitos 30% 1.890 uL
Monócitos 4% 252 uL
Eosinófilos 3% 189 uL
Basófilos 3% 189 uL
Alterações Morfológicas
* Linfócitos reacionais;
* Monócitos ativados;
* Alterações tóxicas em neutrófilos ( basofilia citoplasmática, granulação tóxica e corpúsculos de Döhle.);
* Hiporsegmentação de neutrófilos;
* Acúmulo lisossomal;
* Inclusão viral - Corpúsculo de Lentz
* Hemoparasitas ( Ehrlichia sp. e Hepatozoon canis)
